磁性纳米材料制备的免疫磁性微球在生物医学方面的应用

技术分类: 工程材料    作者:东方网  发表时间:2007-10-24
移植后一年内不能检测出IL2的分泌,但NK细胞的功能在移植后一个月正常,在第二和第三个月甚至超出一般水平,在20例病人中,应用联合免疫荧光法证明自身骨髓移植包含有能够被免疫磁性微球清除的恶性细胞。


   Ogniben等人对IMMS在NHL病人自身骨髓移植中的应用也做了研究。

③用于清除白血病细胞  KorbingLI等人收集了2例复发的急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的骨髓,手机时间为二次缓解期的早期。免疫磁性处理过程为姿势呢骨髓与连接在磁性微球上的一组单抗一起培养。移植前治疗方案为全身照射(TBI)(14.4Gy)和环磷酰胺(CY)(50mg/kg,每周2次,共4周)。自身骨髓移植后,在3例病人中都能观测到血相重建。三人在术后的无病存活期分别为26个月、24个月、27个月。其中两人的无病存活期超过了先前的缓解期(20个月和12个月)。

  De Rore等人报告了65例急性白血病或NHL患者的ABMT结果。其中11例应用IMMS进行骨髓净化,31例用Maphosphamide进行骨髓净化,14例没有进行骨髓净化。免疫磁性清除过程包括一次与三种单抗(CD10、

CD19、CD22)的培养,两次与磁性微球的培养。单核细胞与CFU-GH在免疫磁性净化后的恢复率分别为40%和45%,在Maphosphamide净化后恢复率分别为84%和5%。除过Maphosphamide净化后血小板的恢复率较慢小,白细胞、中性白细胞及血小板在三组病人中的恢复速度均类似。

  Gruhn、Trickettti等人对IMMS在急性淋巴细胞性白血病中的应用进行了探讨。

④在其他肿瘤的骨髓净化中的应用  Ball、Myklebust等人将IMMS应用于小细胞肺癌病人的自身骨髓移植。Shpall、Anderson等人将IMMS应用于乳腺癌病人的自身骨髓移植,对应用IMMS清除乳腺癌的最优条件进行了探讨。

⑤IMMS与其他骨髓净化方法的联合使用  有多项研究表明,联合应用免疫磁性微球与化学分离法会比单一应用任何一种技术更能有效地从骨髓中清除掉癌细胞,当然,这对骨髓早血细胞的损伤也较大。Anderson等人联合应用免疫磁性微球和化学分离法从正常骨髓中清除CAMA-1乳腺癌细胞。结果表明,免疫磁性分离后运用40μg/M1的4-HC清除残余的癌细胞可获得4.5个对数级的癌细胞清除率。


  免疫磁性微球用于骨髓中癌细胞的清除也有一些缺点,主要是在方法学、靶细胞种类、检测方法的灵敏度等方面变异性较大,但仍不失为一种安全、简便、有效的方法。


(2)免疫磁性微球在其他方面的应用  自身骨髓移植时清除其中的癌细胞只是免疫磁性微球的一个应用,它在医药学中的应用非常广泛,如分离其他核细胞、分离细胞器、在微生物和分子生物学上的应用等等。


①分离其他真核细胞


a.异体骨髓移植清除T细胞  自身骨髓移植为防止移植物抗宿主反应(GVHD),需要从骨髓中有效地清除T细胞。Vartdal等对直接T细胞清除法做了改进,磁珠首先与羊抗鼠IgG相连,然后再与抗CD2和CD3的单抗体结合。用此方法清除了3个数量级的T细胞。Frame,Gee和Knobloch[42]等人也报告了相似的结果。Champlin等用免疫磁珠在异体骨髓移植前只清除其中的CD8+细胞,结果发现即可以防止GVHD,又保留了移植物抗白血病的能力。应用免疫磁性微球分离T细胞的还有A1eixo等人。


b.阳性分离干细胞  直接移植骨髓干细胞是克服异体骨髓移植时GVHD和ABMT时癌症复发的一种可能的选择,但最大的困难是如何分离出纯的造血干细胞。Cottler-Fox等采用反相分离技术,即用连有二抗的免疫磁珠和抗CD3、CD4、CD14、CD16的单克隆抗体清除掉所有非干细胞。可以获得不到2%的细胞,但其中保留了所有原先存在的造血干细胞。正相分离干细胞的方法也受到重视。如Smeland等采用直接联有抗CD34+细胞的单克隆抗体的免疫磁珠来分离干细胞,分离后用抗Fab段血清将磁性从细胞上洗脱下来,用此方法可以获得40%~70%的CD34+细胞,纯度可达95%以上。应用免疫磁性微球分离造血干细胞的文献非常多,如Law,Silvestri,Nakamura,Bigas等等。


C.组织分型  器官移植中的HLA-1和HLA-2组织分型一般采用数量细胞毒实验,首先要采用密度离心法将细胞从外周血中分离出来,步骤烦琐费时。Vardal等发展了基于免疫磁珠技术的HLA分型方法,结果表明,磁珠不影响后续的微量细胞毒分析。Lie等发现用此方法也可进行血清的BoLA分型,并且明显优于传统方法。Hanen
    and Hanne









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